iMuSCs, #10(1)

Figure 1
IMuSCs display stemness and exhibit improved migration ability.
srep17355-f1
(a) Schematic of iMuSCs isolation method from injured murine TA muscles. (b) Bright field images of uninjured and injured cultures. 3 days after the cell isolation no cells appeared in the control uninjured cultures, but iMuSCs were present in the injured cultures. 7 days after cell isolation, the proliferation of iMuSCs was apparent. Scale bar = 10 μm. (c) Msx1 (green), Pax7 (red), Cxcr4 (green), and Sca1 (red) expression of iMuSCs. Nuclei were stained with DAPI (blue). Scale bar = 100 μm. (d) qPCR analysis of whole biopsied TA muscles, and (e), fresh isolated iMuSCs. (f) Single cell migration pathways of iMuSCs, and the control C2C12 and MuSCs. The migration paths of 20 individual cells from different experimental groups captured in a time-lapse motility assay. Data was pooled from 3 independent experiments. Graphs show the calculated accumulated distance and velocity of the cells. Data are represented as the mean ±SEM of 60 individual cells from 3 biological replicates. **P < 0.01. (g) qPCR analysis of β-Catenin, E-Cadherin, M-Cadherin, N-Cadherin expression of iMuSCs. Data are represented as the mean ±SEM of 5 biological replicates.
図1
iMuSCsは幹細胞性を示し、優れた移動能力を発揮する。
(a)傷害マウスTA筋からのiMuSCs単離方法のシェーマ。(b)非傷害マウス由来細胞培養と傷害マウス由来細胞培養。細胞単離後3日目、非障害マウス由来細胞培養からは何も得られなかったが、傷害マウス由来細胞の培養からiMuSCsが出現した。細胞単離後7日目、iMuSCsの増殖が鮮明に認められた。Scale bar = 10 μm。(c) iMuSCsにおけるMsx1(緑)、Pax7(赤)、Cxcr4(緑)、Sca1(赤)の発現。核は DAPI(青)で染色した。Scale bar = 100 μm。(d)TA筋全生検のqPCR解析、及び(e)新鮮単離iMuSCsのqPCR解析、(f)iMuSCsの単細胞遊走路、及びコントロールC2C12、MuSCsの単細胞遊走路。低速度撮影運動実験において捉えられた異なる実験グループ由来の20個の細胞の移動道程。3回の独立した実験からデータを収集した。グラフは、細胞の算出後の移動距離と速度を示す。データは、3回反復実験から得られた異なる60個の細胞の平均±SEMで表わした。**P < 0.01。(g)iMuSCsにおけるβカテニン、E-カヘドリン、M-カヘドリン、N-カヘドリン発現のqPCR解析。データは、5回反復実験の平均±SEMで表わした。
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