iMuSCs, #１０（２）

Figure 2

Multiple differentiation and muscle engraftment of iMuSCs.

(a) Induced myotube formation of iMuSCs. Myotubes expressed MyHC (red). The fusion index was similar to the control C2C12 and MuSCs. (b) Representative bright-field picture shows iMuSCs-formed neurospheres floating in suspension. Immunofluorescence staining of cryosectioned neurospheres shows Nestin (green), CNPase (red), and Nefm (red) positive cells. Plated 21 day differentiated neurospheres in ND medium show neural phenotype; β-Tubulin III (red), and Nefm (green). Nuclei were stained with DAPI. Scale bar = 10 and 100 μm. (c) Gene expression kinetics of Mtap2 and β-Tubulin III, and Olig1 and Olig2 in the neural differentiating iMuSCs analyzed by qPCR. Data were compared to undifferentiated iMuSCs, and are presented as the mean ±SEM of 5 biological replicates. (d) Engraftment of iMuSCs after intramuscular cell implantation. IF staining shows Utrophin+ (green) and Dystrophin+ (red) muscle engraftment of control MuSCs and iMuSCs in mdx/scid mice 2 weeks after cell injection. Scale bar = 100 μm. Quantification of Dystrophin+ myofibers. **P < 0.01.

図２

iMuSCsの多能性と筋移植

(a)iMuSCsによる誘導筋管形成。筋管はMyHC（赤）を発現した。フュージョンインデックスは、コントロールとして用いたC2C12及びMuSCsと類似していた。(b)典型的な明視野を有する写真は、浮遊液中に浮いているiMuSCsによって形成された神経球。凍結切片により作成された神経球の免疫蛍光染色は、Nestin（緑）、CNPase （赤）、Nefm （赤）陽性細胞を示す。ND培養液で21日間培養した神経球は神経表現型を示した：β-Tubulin III（赤）、Nefm （緑）。核は DAPIによって染色された。Scale bar = 10 and 100 μm。(c) 神経系への分化を示すiMuSCsにおけるMtap2、β-Tubulin III、 Olig1、Olig2の遺伝子発現動態。qPCRにより解析した。データは、未分化iMuSCsと比較し、5回反復実験の平均±SEMで示した。(d)iMuSCs筋内細胞移植後の生着状態。免疫蛍光染色に得られたユートロフィン（緑）陽性及びジストロフィン（赤）陽性の筋移植状態を示す。コントロールMuSCsと細胞注入後２週間のmdx/scidマウスから得られたiMuSCsを比較検討した。Scale bar = 100 μm。ジストロフィン陽性筋線維の量。 **P < 0.01.

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